在蛋白质检测实验中,抗体选择是决定研究结果的关键因素。如果所选抗体质量低下,实验的可重复性可能会降低。因此,选择合适的抗体不仅对于减少实验时间和成本至关重要,而且对于提高结果的可靠性也至关重要。
本文将讲解抗体选择的关键点,希望这些信息能对您的日常实验有所帮助。
了解抗体选择的基础知识
抗体仅仅与靶标结合是不够的。需要根据实验目的选择合适且可靠的产品。我们将从五个方面讲解其中的关键点。
1.验证与目标的交叉反应
在寻找针对目标蛋白的抗体时,检查反应性非常重要。反应性是指已确认抗体能与哪些动物种属发生反应,是抗体目录中始终列出的信息之一。请务必检查您使用的动物种属是否包含在内。
2.多克隆抗体和单克隆抗体的选择
普通抗体产品大致分为两类:可与抗原中多个表位反应的多克隆抗体,以及与特定表位反应的单克隆抗体。有关每种类型的特性和推荐用途,请参阅以下文章。
3.考虑宿主物种和同型
选择二抗时,需要检查宿主物种和亚型。宿主物种是指用于产生抗体的动物物种。选择二抗时,需要选择能够与所用一抗的动物物种结合的二抗。
同型也称为类别,在哺乳动物中有五种:IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。由于大多数二抗识别特定的同型,因此需要选择与实验中使用的一抗同型相匹配的二抗。
4.查看适用应用程序和使用历史记录
一些抗体已针对特定应用进行验证,例如蛋白质印迹法(WB)、免疫组织化学(IHC)和流式细胞术(FACS)。如果您在特定实验中使用常用抗体未获得良好结果,请考虑寻找适合您应用的抗体。
5.检查验证数据
关于第4点,为了选择合适的抗体,务必查看制造商发布的验证数据。如果产品说明书或网页包含验证抗体性能和特异性的实验结果,则值得信赖。产品介绍页面上引用的论文也是重要的信息来源。
如何有效地找到抗体
1.使用专门的搜索引擎
就像PubMed用于搜索研究论文一样,也有专门的抗体服务,你可以在此网站进行检索。搜索抗体时,输入目标蛋白或产品名称,该抗体的搜索结果将按论文被引用次数的顺序显示。
另一个推荐的搜索服务是Antibodypedia。该服务也允许您搜索抗体信息和引用论文,并可轻松查看实验结果图像。CiteAb和Antibodypedia都允许您根据用途(例如WB或FACS)缩小搜索范围。
2.参考评论和论文
实际使用过该产品的研究人员的评价是选择抗体时的重要信息来源。除了论文描述外,您还可以在上述搜索服务以及制造商网站的评论区找到研究人员的真实意见。在比较产品时,请务必参考这些意见。
3.比较不同供应商
当不同供应商销售类似抗体时,您需要根据数据表和验证实验,仔细考虑它们是否适合您的目的。抗体选择基本要点部分中列出的要点会对您的实验结果产生重大影响,因此请务必仔细检查。咨询制造商的技术支持,了解适合您预期用途的抗体也是非常有效的。
抗体对实验的结果至关重要,它会影响实验结果可靠性,大家可以参考上述方法来选择抗体。如果您对抗体选择还有疑问,可以询问上海通蔚生物在线客服进一步寻求帮助来选择合适的抗体。