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什么是细胞培养基?一文深入了解细胞培养基

发布时间:2024-02-26     发布作者:通蔚生物

  在进行生命科学实验研究时,科研人员必须创造适当的条件来适应细胞的生存或生长。因为细胞培养需要一定的环境条件,为了实现理想的生长和增值,细胞需要:

  1.温度控制

  2.适当的pH值和渗透压

  3.细胞附着的基质

  4.某种类型的培养基

  5.保持稳定条件的培养箱

  本文将深入探讨细胞培养基。为大家将介绍什么是细胞培养基、其成分是什么、不同类型以及选择合适的细胞培养基时应注意的事项


  什么是细胞培养基?


  细胞培养基,也称为生长培养基,人工模拟细胞体内生长的营养环境,维持细胞生长的营养物质,它是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。



细胞培养基

  当从活体中取出细胞时,他们必须将它们保存在适当的人工环境中。培养基在细胞培养技术中发挥着不可或缺的作用,支持体外细胞研究。

  它是提供细胞培养物生存和增殖所需营养的培养基。生长培养基还提供正确的渗透压和pH值。

  在选择合适的生长培养基时必须考虑其细胞类型。有多种不同类型的细胞培养基可容纳来自哺乳动物、植物、昆虫、细菌、酵母、病毒等的细胞。

  细胞培养基的成分是什么?


  细胞培养基由旨在支持细胞生长的化合物和营养素的组合组成。细胞培养基的常见成分包括:

  1、氨基酸:每种细胞培养基都含有氨基酸混合物,氨基酸是蛋白质的组成部分。必需氨基酸和非必需氨基酸均可用于促进细胞活力和生长。

  2、维生素:维生素可促进细胞生长和增殖。血清在含血清培养基中用作许多维生素的来源,但在无血清培养基中必须添加维生素。

  3、碳水化合物:碳水化合物为活细胞提供能量来源。通常使用葡萄糖,但也可以使用其他碳水化合物,例如半乳糖、果糖或麦芽糖。

  4、无机盐:需要无机盐来调节膜电位和渗透压。

  5、基本元素和微量元素:细胞生长需要铁、钾、镁和锌等元素。

  6、血清:血清含有生长因子和抑制剂、激素、蛋白酶抑制剂、螯合剂、氨基酸、碳水化合物、脂质、维生素、微量元素、矿物质等细胞生长所需的物质。常用的是牛血清

  7、激素:可能添加某些激素来影响细胞功能、生长和增殖。

  8、缓冲系统:缓冲系统调节pH值。

  9、补充剂:有时会在细胞培养基中添加激素、酶抑制剂和微量元素等补充剂,以满足细胞类型和研究目标。

  10、抗生素:将抗生素添加到细胞培养基中以抑制真菌和细菌的生长。由于蛋白质可以结合一些抗生素负载,因此抗生素最适合血清培养基。相反,无血清培养基中的细胞发生抗生素毒性的可能性更大。

  细胞培养基有哪些不同类型?


  细胞培养基可分为两大类:天然培养基和合成培养基。

  一、天然培养基

  天然培养基是源自组织提取物或动物体液的培养基,例如血浆、淋巴液和血清。可以分为三类:

  1、生物体液:示例包括血清、血浆、淋巴液和羊水。

  2、组织提取物:例子包括胚胎、骨髓、肿瘤和肝脏提取物。

  3、凝块或凝血剂:例子包括血浆凝块和凝血剂。

  血清是最常见的天然培养基。血清甚至用作合成培养基培养物的补充剂。牛血清因其资源丰富、使用时间长等优点而广受欢迎。

  二、合成培养基

  1、合成介质(也称为人造介质)是使用各种有机和无机化合物创建的介质。合成媒体包括:

  2、含血清培养基:使用补充血清的合成培养基。

  3、无血清培养基:无血清培养基(SFM)比含血清培养基具有更高的一致性,使研究人员能够在不需要血清的情况下支持细胞生长和增殖。

  4、化学成分确定的培养基:化学成分确定的培养基无污染,仅由纯化的有机和无机成分组成。

  5、无蛋白培养基:无蛋白培养基不含蛋白质。根据需要添加蛋白质补充剂。

  6、平衡盐溶液(BSS):BSS本身用于保持细胞存活。BSS富含营养物质和其他化合物,可形成能够支持细胞生长和增殖的培养基。因此,BSS构成了许多类型的复杂媒体的基础。

  无血清培养基(SFM)通常分为基本/基础或复杂两类。基础培养基是指没有添加物的培养基。一旦将生长补充剂添加到基础培养基中,它就变成了复杂的培养基。

  如何选择细胞培养基


  上述为大家介绍细胞培养基的种类,该如何选择细胞培养基,通蔚生物为大家提供了6个建议参考:

  1、确定细胞类型:首先,了解您要培养的细胞的类型,包括其来源、生长特性和营养需求。不同类型的细胞可能对不同的培养基有不同的反应,因此选择适合细胞类型的培养基是至关重要的。

  2、参考细胞库或供应商建议:如果您购买的细胞是从细胞库或供应商处获得的,他们通常会提供关于培养基的建议。您可以咨询供应商或查找相关文献,以获取针对特定细胞系的培养基推荐。

  3、考虑实验目的:您的实验目的也会影响培养基的选择。例如,如果您需要进行细胞增殖实验,您可能需要选择富含营养物质的完全培养基。而如果您需要研究细胞的分化或特定功能,可能需要选择更为特定的培养基,如神经细胞培养基或干细胞培养基。

  4、了解培养基成分:在选择培养基时,仔细查看其成分表,确保它包含细胞生长所需的关键营养物质,如氨基酸、维生素、无机盐等。此外,还要注意培养基中是否含有血清、生长因子等补充成分,以及它们的来源和质量。

  5、考虑成本和可用性:在选择培养基时,还需要考虑其成本和可用性。不同品牌的培养基价格可能会有很大差异,而某些特定的培养基可能难以获得。因此,在选择培养基时,需要综合考虑其性价比和实验室的实际需求。

  6、进行试验验证:最后,进行试验验证是选择合适培养基的重要步骤。您可以在实验室中设置对照实验,比较不同培养基对细胞生长和繁殖的影响,从而选择最适合您实验需求的培养基。

  细胞培养基的制备与保存


  有多种培养基可供选择,可根据不同类型的细胞及其代谢要求进行定制。大多数市售培养基以脱水或粉末形式(用于原核培养物)、液体浓缩物或细胞系工作溶液的形式提供。

  –脱水培养基-使用无菌技术溶解在蒸馏水中,调节pH值,并在使用前灭菌。

  –粉状培养基-溶解在蒸馏水中,搅拌,灭菌,然后使用无菌技术倒入无菌培养皿中(例如LB肉汤,通常用于细菌培养)

  –液体浓缩物通常使用无菌技术在蒸馏水中稀释,调整pH值并储存在无菌容器中以供进一步使用。

  –在无菌过滤和无菌条件下添加血清或补充剂(例如抗生素)后,制备成工作溶液的培养基即可立即使用,然后在添加到细胞之前预热至37°C。

  培养基通常通过过滤、煮沸或高压灭菌进行灭菌。即用型工作介质溶液通常以无菌形式出售,但在处理时建议采用无菌过滤和无菌技术。在所有情况下,都使用无菌技术来避免交叉污染和不需要的微生物的生长。

  可以将血清添加到细胞培养基中以促进某些细胞系的生长。胎牛血清(FBS)是细胞培养物中最常见的血清之一。还可以添加激素和其他生长因子来帮助特定类型细胞的生长。此外,还可以添加IPTG等添加剂来促进蛋白质的表达。此外,通常添加抗生素来抑制细菌和真菌的生长。关于胎牛血清,可以参考:《什么是胎牛血清

  细胞培养基制备好后,以液体形式或琼脂形式保存在4°C的避光条件下,以避免机会微生物的生长和培养基成分的光降解。使用时,在添加细胞之前将培养基预热至37°C水浴中进行30分钟。

  通蔚生物细胞培养基采用先进的生产工艺和严格的质量控制体系,确保每一批产品都达到最高的质量标准。我们精选优质原材料,通过科学配方和精准控制,为细胞提供均衡、全面的营养支持。

  无论是基础培养基还是完全培养基,通蔚生物都提供多种选择,以满足不同细胞类型和实验需求。我们的培养基具有良好的稳定性和重复性,确保实验结果的可靠性和一致性。