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ELISA实验常见样本—细胞

发布时间:2024-01-31     发布作者:上海通蔚生物

  在科研实验,ELISA进行检测的样本类型包括常见的血液(血清、血浆),组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水等。今天由上海通蔚生物来介绍一下样本细胞。


细胞


  细胞样本根据目的物所在部位可选择细胞裂解液细胞培养上清作为样本。

  •   如果目的物所是分泌型,存在于细胞之外的话,即可选择细胞培养上清作为样本。
  •   胞培养上清处理方法:取细胞培养上清,1000×g离心20分钟,取上清即可检测。

  目的物是存在于细胞内,则建议选择细胞裂解液作为样本。细胞裂解液处理方法如下:

  1.   贴壁细胞需要先用胰酶消化,离心收集细胞(悬浮细胞可直接离心收集);
  2.   将收集到的细胞用冷PBS洗3次;
  3.   物理方法裂解细胞(可先超声破碎细胞,再反复冻融):
  4.   超声破碎:取适量PBS重悬细胞,用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂;
  5.   反复冻融:将待破碎的细胞在-20℃以下冰冻,室温融解,反复3次,使细胞溶胀破碎;
  6.   将标本于2-8度1500×g离心10分钟,收集上清备用。

  细胞裂解液处理过程中,物理方法更优异于化学方法,化学方法会引入酸或碱,可能会对ELISA实验产生影响。利用化学的细胞裂解液裂解细胞,如果去污剂成分会干扰抗原抗体反应影响检测效果,推荐利用透析和超滤的方法除去去污剂成分。

  样本保存事项:


  在处理样本过程就是收集目标蛋白,由于这些目标蛋白容易变性,降解,该过程要尽量的温和。赝本处理之后存储也非常重要,不要反复冻融,处理后的样本尽量密封保存,保存温度在4°保存要小于一周,-20°保存要小于1个月,-80°保存要小于2个月。

  上述是上海通蔚为大家介绍ELISA实验常见样本细胞处理方法,希望对大家有所帮助!上海通蔚生物有ELISA试剂盒,灵敏度高,易用受广大科研者青睐,欢迎选购。