ELISAKIT的基本组成和操作流程

   elisa试剂盒对于搞科研的人来说还是比较神秘，elisa试剂盒来的时候就是一个盒子，这个盒子到底有什么神奇的地方呢？又有哪些部分组成？具体操作流程有哪些？下面跟随上海生蔚一起来了解一下吧！

  ELISAKIT的基本组成

elisa试剂盒

  酶标板：用于抗原-抗体复合物的孵育和洗涤。

  酶标抗体：与待测样本中的抗原特异性结合的抗体，通常采用辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）标记。

  酶标二抗：与酶标抗体结合的特异性抗体，用于增强信号。

  底物：用于显色反应的化学物质，如TMB（四甲基联苯胺）或ABTS（二氨基联苯胺）。

  终止液：用于停止显色反应的液体，通常是硫酸。

  洗涤液：用于清洗酶标板上的未结合物质。

  说明书：包含操作指南和注意事项。

  ELISAKIT操作流程

elisa试剂盒操作步骤

  准备工作：将所需试剂从冰箱中取出，恢复至室温。准备一块干净的酶标板，根据实验设计设置合适的孔数和加样位置。

  加样：根据说明书要求，将待测样本和标准品加入酶标板上的相应孔中。通常采用自动加样器或手工滴加。

  孵育：将酶标板封闭后，在恒温条件下孵育一定时间，使抗原-抗体复合物形成。

  洗涤：用洗涤液清洗酶标板，去除未结合的物质。

  加酶标抗体：将酶标抗体加入酶标板上的相应孔中，封闭后再次孵育。

  洗涤：用洗涤液清洗酶标板，去除未结合的酶标抗体。

  加底物：将底物加入酶标板上的相应孔中，孵育一定时间后显色。

  终止反应：用终止液停止显色反应。

  检测：用酶标仪读取各孔的光密度值，记录数据并进行分析。

  数据处理与分析：根据所得数据计算待测样本的浓度或活性。可以参考说明书提供的标准曲线或计算公式进行计算。

  结果报告：根据实验目的和要求，撰写实验报告并提交结果。

  上海通蔚提醒，在使用ELISA试剂盒时，需要注意以下操作事项：

  仔细阅读试剂盒说明书，了解试剂盒的原理、操作步骤和注意事项。

  实验室环境应保持清洁，避免污染试剂盒。

  所有试剂在操作前需要充分混匀，避免沉淀或分层。

  加样时，应按照说明书要求，使用自动加样器或手工滴加。

  孵育时间应按照说明书要求进行，以确保抗原-抗体复合物充分形成。

  洗涤要充分，每孔洗液加样过少或残留都会导致显色过快，同时背景较高。

  手洗板时所用枪头悬空加入洗液，避免洗液污染。

  剩余酶标板条应及时放入干燥袋，避免受潮。

  试剂盒保存条件应严格按照说明书要求进行，过高的温度或过低的冷藏温度都会导致试剂盒敏感性下降。

上述是上海通蔚介绍的ELISA试剂盒的基本组成和操作流程，在操作试剂盒过程务必要注意事项，避免导致实验过程导致读数出现误差。