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细节决定成败:胎牛血清解冻的常见方法

发布时间:2024-04-08     发布作者:通蔚生物

    胎牛血清(FBS)是从胎牛全血中离心分离出来的血清,是培养细胞的理想营养来源,因为它含有蛋白质、脂质、盐、维生素、矿物质、氨基酸和生长所需的其他成分。血清产品解冻不当不仅会降低其即时和长期稳定性,还会降低其有效性。那么,胎牛血清怎么解冻?下面由通蔚生物来详细的介绍一下。

  胎牛血清

图1.胎牛血清

    胎牛血清解冻前准备

  
    1、检查血清: 确认血清包装完好,标签信息清晰,包括批号、有效期等。
  
    2、准备材料: 75%酒精,无菌吸管或移液器,无菌离心管或其他合适的容器。
  
    3、清洁工作台: 用75%酒精擦拭工作台面和所有将要使用的器材,确保无菌操作环境。
  

    胎牛血清解冻方法及注意事项

  
    胎牛血清解冻分为缓慢解冻法和快速解冻方法。缓慢解冻方法是这是最推荐的方法,可以最大程度地保证血清的质量。步骤如下:
  
    ①、通常的做法是将血清从-20°C的冰箱中取出,放在2-8°C的冰箱中过夜解冻。
  
    ②、再将血清置于室温下使之全部融解,在融解过程中需及时规则地轻柔混匀。血清在溶解过程中可能会析出絮状物,这些成分主要是血清中的纤维蛋白,是正常现象,对后续的培养无害,不需去除。
  
    ③、解冻后处理:
  
    分装: 将解冻后的血清分装到无菌的离心管或其他合适的容器中,每份的量根据实验需求决定。
  
    标记: 在分装后的容器上标记日期、批号等信息。
  
    储存: 将分装后的血清置于2-8°C冰箱中储存,或根据需要进行过滤除菌等操作。
  
    注意事项:在融化过程中需不断轻柔摇晃均匀(小心勿形成气泡),使温度与成分均一,削减沉积的发作。
  
    快速解冻
  
    所谓快速解冻法是将血清放在37°C的水浴中解冻。快速解冻步骤如下:
  
    ①、在水浴锅中注入足够的水,使产品浸入接近血清水平的位置。请勿将瓶子浸入螺纹盖中。
  
    ②、将每个瓶子放入 37° 水浴中。
  
    ③、每 10 分钟轻轻旋转或摇动瓶子,直至血清完全解冻,或在解冻时使用摇动水浴摇动血清。
  
    ④、完全解冻后旋转瓶子以达到均匀性。
  
    ⑤、解冻后处理:
  
    分装: 将解冻后的血清分装到无菌的离心管或其他合适的容器中,每份的量根据实验需求决定。
  
    标记: 在分装后的容器上标记日期、批号等信息。
  
    储存: 将分装后的血清置于2-8°C冰箱中储存,或根据需要进行过滤除菌等操作。
  
         注意事项
  
    整个操作过程中保持无菌环境。
  
    避免反复冻融,解冻后的血清应尽快使用。
  
    避免剧烈摇晃,以免血清蛋白变性。
  
    解冻时间根据血清体积调整,确保血清完全解冻。
  

    注意水浴锅温度不要超过 37°C,以免影响血清质量。


            不同胎牛血清解冻方法优缺点对比

  
    缓慢解冻(2-8°C 解冻)
  
    优点:
  
    最大程度保证血清质量: 温度变化缓慢,对血清中蛋白质、生长因子等成分的影响最小,可以最大程度地保留血清活性。
  
    操作简单方便: 只需将血清从 -20°C 冰箱转移到 2-8°C 冰箱即可,无需额外设备或操作。
  
    缺点:
  
    解冻时间长: 通常需要过夜或更长时间才能完全解冻,不适合紧急情况。
  
    快速解冻(37°C 水浴解冻)
  
    优点:
  
    解冻速度快: 短时间内即可完成解冻,适合紧急情况。
  
    操作相对简单: 只需准备 37°C 水浴即可。
  
    缺点:
  
    可能影响血清质量: 温度变化较快,可能导致部分蛋白质变性或活性降低,对血清质量有一定影响。
  
    需要更仔细的操作: 需要控制水浴温度和时间,避免水浴污染等问题。
  
    总结:
  

    上述是胎牛血清怎么解冻的方法推荐,关于胎牛血清比较推荐缓慢解冻法,可以最大程度保证 血清的质量。因为篇幅有限,上述内容仅供参考,如果您对胎牛血清解冻还有疑问,可以寻求我们在线顾问一对一解答!