发布时间:2024-02-26 发布作者:通蔚生物
在实验室里,我们常会看到这样的现象,培养细胞时几乎总是添加FBS(胎牛血清)。或许您会问“什么是胎牛血清,它有什么用途?”接下来文章通蔚生物带大家聊聊“FBS”。
动物细胞不能单独在培养基中生长,必须补充血清。血清作为激素来源,增强培养基的缓冲作用,并防止酚红和各种蛋白酶的侵害。然而,还有许多未知物质,并且我们还没有找到任何可以替代血清的物质,所以我们别无选择,只能添加它。
理想情况下,人体细胞使用人血清,小鼠细胞使用小鼠血清是好的,但它们很难获得,在现实中很少使用。原因是血液量大,而且在大多数情况下,当奶牛养殖中诞生一头公牛时,收集材料来流产它相对容易。
胎牛血清缩写 (FBS) 是从牛胎中抽取的血液凝固后剩余的液体部分。通过离心去除细胞、凝固纤维蛋白原和蛋白以得到血清。
虽然胎牛血清已去除细胞和凝血因子,但仍留有许多有助于细胞生长的成分,包括:
牛血清分为胎牛血清、新生牛血清、小牛血清和成牛血清等5类
牛血清类型 |
来源 |
主要特点 |
应用 |
新生牛血清 (NCS) |
小于一周龄的牛 |
高生长因子和营养成分 |
细胞培养、病毒繁殖、生物医学研究 |
胎牛血清 (FBS) |
胎牛(怀孕母牛体内的胎儿) |
高质量、低病毒和细菌污染风险 |
细胞培养、组织工程、生物医学研究 |
小牛血清 |
几个月大的小牛 |
较低的生长因子和营养成分,价格相对便宜 |
细胞培养实验、疫苗生产替代物 |
成年牛血清 |
成年牛的血液 |
低生长因子和营养成分 |
少数特定的生物医学研究和细胞培养实验 |
请注意,表格中提供的信息是概括性的,并可能不包括所有细节。在选择牛血清时,建议进一步查阅产品说明和文献,以确保选择适合您实验需求的牛血清类型。同时,使用牛血清时应遵循相关的生物安全和实验规范。
在许多领域,细胞培养基的生长都被认为非常重要,例如生物技术、疫苗生产、克隆和体外受精。胎牛血清在适当的浓度下使用,可以满足细胞培养物的特定代谢要求,并因其高含量的激素、载体蛋白和大分子蛋白而帮助其生长。胚胎干细胞通过胎牛血清转移到培养基中,导致细胞生长。
此外,当今市场上的许多疫苗都是使用胎牛血清作为细胞培养生长培养基生产的。例如,预防病毒的疫苗利用胎牛血清。最近,在生物技术领域正在进行一些尝试克隆动物组织的实验;这些实验中经常使用 FBS。
就像细胞培养中使用的大多数其他动物血清一样,胎牛血清是由从商业屠宰场收集的血液制成的。胎牛血清生产的第一步是在封闭和隔离的选择系统的帮助下从牛胎儿中采集血液。在屠宰过程中对小牛胎儿进行心脏穿刺,并在将胎儿从已宰杀的牛身上取出后从牛胎儿中抽取血液。血液被冷藏以使其凝结。
然后利用称为离心机的过程从透明的黄色(稻草)色血清中去除纤维蛋白凝块和剩余的血细胞,最后将透明的血清与有槽的血细胞分离。第二步涉及过滤,采用具有三重无菌 0.1 微米滤膜的过滤链。处理后,灭菌的胎牛血清由信誉良好的商业血清供应商进行严格的质量控制测试。如果血清通过了质量控制测试,则会提供详细的分析证书。
虽然血清采集过程比较简单,虽然过滤孔可以去除真菌和细菌,但它们无法根除病毒。每批都要经过病毒检测,从而使所含的病毒失活,其检测方法如下:
一、热灭活胎牛血清
这是经过上述加热灭活处理的FBS。通过灭活胎牛血清中所含的补体,可以防止培养过程中补体系统激活引起的细胞损伤。另一方面,有些细胞的数据和培养结果可能会因失活而受到影响,所以要慎重考虑。
二、γ-辐照胎牛血清
用伽马射线处理胎牛血清可灭活胎牛血清中的病毒。它可用于存在病毒污染问题的情况,例如再生医学研究。
三、活性炭处理(木炭剥离)FBS
使用活性炭去除激素和脂溶性物质的胎牛血清。它可用于涉及受激素影响的细胞的实验系统。
四、不含四环素的胎牛血清
不含四环素的胎牛血清是指胎牛血清中不含有抗生素四环素(tet)。四环素是一种常用的抗生素,有时会在胎牛血清的生产过程中被添加以防止细菌污染。然而,在某些特定的生物学实验和细胞培养中,四环素可能会干扰实验结果或影响细胞的生长和行为。因此,需要使用不含四环素的胎牛血清。尽管号称“不含”,但由于检测极限,不可能完全去除,但各公司都制定了标准,将含有低于一定标准的四环素的产品作为四环素进行销售。因此,在购买这种血清要留意一下。
五、透析胎牛血清
这是通过分馏处理不含低分子的胎牛血清,其 MWCO 低于标准 MWCO。用于需要考虑低分子物质影响的实验系统。由于透析过程会去除一些低分子量物质,这可能会降低透析胎牛血清对某些细胞系的生长促进能力。因此,在使用透析胎牛血清时,需要根据实验的具体需求和细胞的特性进行选择和调整。
六、外泌体耗尽的 FBS
FBS 用于与外泌体相关的实验系统。用于需要考虑 FBS 衍生的外泌体(以及其中包含的核酸)影响的实验系统。因此在使用外泌体耗尽的 FBS 时,需要根据实验的具体需求和细胞的特性进行选择和调整。
七、ES筛选的FBS
该FBS已被制造商确认可维持ES细胞处于未分化状态。研究人员可以减少自己测试的工作量和成本。
八、IgG 耗尽的 FBS
由于 IgG 永远不会被完全去除,因此有时被称为“低 IgG”FBS。它用于在抗体生产、蛋白质纯化和需要考虑 IgG 细胞毒性活性的实验系统过程中培养杂交瘤。
一、储存和保质期
除非标签上另有说明,否则所有胎牛血清产品应储存在 -20°C 或以下。稳定性研究表明,血清产品在这些条件下可保存长达五年,而几乎没有或没有有害影响。请勿使用无霜或除冰型冰箱。每个产品都贴有储存说明标签。
二、解冻分装
快速解冻胎牛血清产品。优选 37°C 水浴。玻璃瓶在放入水浴之前应在室温下放置一小时,以免破裂。请勿反复冷冻和解冻牛血清产品。这将使血清中的多种活性成分降解。有时,血清中可能会出现脂质和/或钙颗粒。这并不表明无菌或血清性能存在问题。建议将血清等分到无菌容器(适合冷冻)中并重新冷冻。
购买FBS时需要注意哪些事项?
购买时请注意以下几点:
胎牛血清价格主要取决于这些因素。一般内毒素越低,血红蛋白越低,灭菌越仔细,价格越高。产品名称也可能根据质量而变化。
关于原产国,如果是来自大生产商的FBS,我认为没有问题,因为动物在进口前已经经过彻底检查,血清的主要生产地包括:
通蔚生物胎牛血清,源于优质的胎牛来源,经过严格的筛选和处理,确保每一滴血清都达到最高的质量标准。胎牛血清采用先进的生产工艺,确保血清中的营养成分和生长因子得到最大程度的保留,为细胞提供最优质的生长环境。
通蔚生物胎牛血清都能为您的实验提供稳定的支持。其高浓度的生长因子和丰富的营养成分,有效促进细胞的生长和分化,让您的实验成果更加显著。