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测定意义
麦芽糖酶是一种水解α-1,4糖苷键的α-葡萄糖苷酶，性状为白色至浅棕黄色粉末。最初定义为催化麦芽糖分解为两分子葡萄糖的酶，现扩展为作用于各类α-D-葡萄糖苷的酶类。麦芽糖是由两分子D-葡萄糖通过α-1,4糖苷键连接的二糖，可通过淀粉酶水解淀粉生成，广泛应用于饴糖、酒精酿造及焙烤工业。
测定原理
麦芽糖酶将样品中麦芽糖水解为葡萄糖; 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在 505nm 有特征吸收峰。
自备仪器和用品
酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、和蒸馏水。
试剂清单
预实验的意义
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试剂名称 |
规格 |
数目 |
贮藏 |
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试剂一 |
液体75mL |
x1 |
4℃ |
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试剂二 |
液体3mL |
x1 |
-20℃ |
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试剂三 |
液体10mL |
x1 |
4℃,避光 |
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试剂四 |
液体10mL |
x1 |
4℃,避光 |
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试剂五 |
液体10mL |
x1 |
4℃，密封 |
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标准品 |
粉剂 |
x1 |
4℃ |
10mg葡萄糖标准粉剂 |
注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。
预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；
2、熟悉生化试剂盒的操作流程，尤其是初次使用生化试剂盒测定；
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整；
5、通过3 - 5组预实验，判断试剂盒对于样本的最佳适应稀释浓度范围，指导实验样本稀释比例。
