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谷氨酰胺(Gln)含量试剂盒微量法/48样
测定原理
自备实验用品及仪器
试剂盒组分与配制
测定意义
谷氨酰胺（Gln）是蛋白质合成的重要组成部分，在生物体内主要以游离态和结合态两种状态存在，游离谷氨酰胺在机体代谢过程中起着重要作用，同时也是三羧酸循环中α-酮戊二酸的主要来源，在能量代谢中发挥重要作用，可通过糖酵解和三羧酸循环途径参与能量的产生与供应。
测定原理
游离谷氨酰胺在谷氨酰胺酶的催化作用下转变为谷氨酸，谷氨酸脱氢酶催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4+，在1-mPMS作用下，WST-8能够与NADH反应生成水溶性Formazan，产物在450 nm处具有特征吸收峰，根据吸光值变化即可定量检测谷氨酰胺的含量。
自备实验用品及仪器
台式离心机、酶标仪、96孔板、可调式移液枪、研钵、恒温水浴锅/培养箱和蒸馏水。
试剂盒组分与配制
提取液：液体60 mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体500µL×1支，-20℃避光保存。使用时分装冻存，避免反复冻融。
试剂二：液体500µL×1支，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。临用前加入5mL蒸馏水混匀溶解，分装冻存，避免反复冻融。
试剂四：液体1.5mL×1瓶，-20℃避光保存。分装冻存，避免反复冻融。
试剂五：液体1.5mL×1瓶，-20℃避光保存。
试剂六：液体1.5mL×1瓶，-20℃避光保存。
试剂七：液体12mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
注意
注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。
预实验的意义
预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；
2、熟悉生化试剂盒的操作流程，尤其是初次使用生化试剂盒测定；
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整；
5、通过3 - 5组预实验，判断试剂盒对于样本的最佳适应稀释浓度范围，指导实验样本稀释比例。
