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021-54845833/15800441009
黄嘌呤氧化酶抑制筛选检测试剂盒
测定意义
测定原理
需自备的仪器和用品
测定意义
黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase，XOD)是一种催化次黄嘌呤羟基化为黄嘌呤及黄嘌呤羟基化为尿酸的酶，由肾脏排泄，尿酸产生过多或排泄不足会导致高尿酸血症。因此开发 XOD 抑制剂可以用于治疗高尿酸和通风类疾病的研究。
测定原理
黄嘌呤氧化酶（XOD)催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子自由基，接着与显色剂反应生成有色物质，在加入抑制剂后，450nm显色的产生会被抑制，根据抑制的程度来确定抑制剂的作用效果。
需自备的仪器和用品
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制
预实验的意义
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试剂名称 |
规格 |
数目 |
贮藏 |
备注 |
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试剂一 |
液体120mL |
x1 |
4℃ |
可用于提取稀释样品 |
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试剂二 |
粉剂 |
x2 |
4℃,避光 |
加9mL试剂一超声溶解，现配现用 |
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试剂三 |
液体 |
x2 |
-20℃,避光 |
避免反复冻融 |
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试剂四 |
液体3mL |
x1 |
-20℃,避光 |
避免反复冻融 |
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试剂五 |
非布索坦 |
x1 |
-20℃,避光 |
5 mmol/L非布索坦，测定抑制率可作为参考，IC50约为3μmol/L |
预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；
2、熟悉生化试剂盒的操作流程，尤其是初次使用生化试剂盒测定；
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整；
5、通过3 - 5组预实验，判断试剂盒对于样本的最佳适应稀释浓度范围，指导实验样本稀释比例。
注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。
