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021-54845833/15800441009
羟基抗氧化能力HORAC(荧光法)检测试剂盒
测定意义
HORAC测定填补了传统抗氧化检测方法无法评估“预防性”抗氧化能力的空白，尤其适用于识别那些通过螯合金属离子来抑制羟自由基生成的物质——这正是许多天然多酚类抗氧化剂的核心作用机制。
测定原理
以荧光素钠为荧光探针，类芬顿反应产生羟自由基，根据羟自由基破坏荧光探针，使荧光强度产生变化，荧光强度的变化大小反映自由基破坏的程度。在抗氧化剂存在时，它可以抑制由自由基引起的荧光变化。抑制程度反映了它对自由基的抗氧化能力。
需自备的仪器和用品
天平、丙酮、离心机、烘箱、荧光酶标仪、黑色96孔板、匀浆器。
试剂组成和配制
注意
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试剂名称 |
规格 |
数目 |
贮藏 |
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提取液 |
液体100mL |
X2 |
4℃ |
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试剂一 |
液体500µL |
x1 |
-20℃,避光 |
临用前用提取液稀释100倍 充分混匀，现配现用。用不完的试剂一分装冻存避免反复冻融。 |
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试剂二 |
液体500µL |
x1 |
-20℃,避光 |
临用前取出243µL与757µL蒸馏水充分混匀，现用现配，不可保存。 |
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试剂三 |
粉剂 |
X2 |
-20℃,避光 |
临用前加入2mL蒸馏水充分溶解，现用现配。 |
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标准品 |
粉剂 |
X1 |
-20℃,避光 |
没食子酸（临用前称取1.7271mg加入10mL提取液充分溶解即为1000µmol/L）现用现配，不可保存。 |
注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。
预实验的意义
预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；
2、熟悉生化试剂盒的操作流程，尤其是初次使用生化试剂盒测定；
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整；
5、通过3 - 5组预实验，判断试剂盒对于样本的最佳适应稀释浓度范围，指导实验样本稀释比例。
