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021-54845833/15800441009
肌酐含量(肌氨酸氧化酶法)检测试剂盒96样
测定意义
肌酐(Creatinine，CRE)是肌肉代谢的产物，主要通过肾小球滤过排出体外。在正常情况下，体内肌酐的含量基本稳定。血液中的肌酐浓度可作为检测肾小球滤过功能的指标之一。
测定原理
肌酐酶特异作用于肌酐生成肌酸，肌酸在肌酸酶和肌氨酸氧化酶的相继作用下生成过氧化氢，过氧化氢与显色剂反应呈现紫色，该有色物质在546nm有最大吸收峰，进而计算得到肌酐含量。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。
测定步骤
测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，设置温度再37℃，调节波长至546nm。
2、在EP管中加入下列试剂：
注意
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试剂(μL) |
测定管 |
空白管(只做一管) |
标准管(只做一管) |
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样本 |
6 |
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蒸馏水 |
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6 |
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标准品 |
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6 |
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试剂一 |
180 |
180 |
180 |
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混匀，37℃孵育5min后于546nm处读取吸光值A1 |
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试剂二 |
60 |
60 |
60 |
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混匀，37℃孵育15min后于546nm处读取吸光值A2ΔA=A2-A1 |
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注意
1.如果ΔA大于0.8，需要将样本用蒸馏水稀释，计算公式中乘以相应稀释倍数。
如果ΔA的值小于0.01，可增加样本加样体积V1(如由6μL增至20μL，则试剂二相应减少，空白管和标准管变化同测定管)，或增加样本取样质量W；则改变后的V1和W需带入公式重新计算。
预实验的意义
预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；
2、熟悉生化试剂盒的操作流程，尤其是初次使用生化试剂盒测定；
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整；
5、通过3 - 5组预实验，判断试剂盒对于样本的最佳适应稀释浓度范围，指导实验样本稀释比例。
