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胃蛋白酶(Pepsin)活性检测试剂盒(UV法)
测定意义
测定意义
胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别，慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
测定原理
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解，水解产物在280nm有特征吸收峰。通过计算吸光值的变化来计算酶活。
自备仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔UV板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
试剂清单
注意
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试剂名称 |
规格 |
数目 |
贮藏 |
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试剂一 |
液体100uL |
x1 |
4℃ |
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试剂二 |
液体20mL |
x1 |
4℃ |
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试剂三 |
粉剂 |
x1 |
4℃,避光 |
临用前加入10mL试剂二充分溶解 |
|
试剂四 |
粉剂 |
x1 |
4℃ |
临用前加入10mL蒸馏水充分溶解 |
注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。
预实验的意义
预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；
2、熟悉生化试剂盒的操作流程，尤其是初次使用生化试剂盒测定；
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整；
5、通过3 - 5组预实验，判断试剂盒对于样本的最佳适应稀释浓度范围，指导实验样本稀释比例。
