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氧基抗氧化能力ORAC检测试剂盒
测定原理
测定意义
氧基抗氧化能力（OxygenRadicalAbsorbance Capacity, ORAC）是一种检测各种样品中生物分子抗氧 化能力的经典方法。ORAC方法对抗氧化性能的评价具有特异性好、灵敏度高、测定范围广，以及适合抗氧 化活性的高通量筛选等优点，在天然产物抗氧化提取物中得到越来越多的应用，食品及功能食品企业普遍采用 ORAC作为功能食品的重要评价标准。
测定原理
以荧光素钠为荧光探针，偶氮类化合物AAPH作为过氧自由基来源，根据自由基破 坏荧光探针，使荧光强度产生变化，荧光强度的变化大小反映自由基破坏的程度。在抗氧化剂存在时，它可以 抑制由自由基引起的荧光变化，抑制程度反映了它对自由基的抗氧化能力。
需自备的仪器和用品
天平、丙酮、PBS、离心机、烘箱、荧光酶标仪、黑色96孔板、匀浆器。
试剂组成和配制
注意
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试剂名称 |
规格 |
数目 |
贮藏 |
备注 |
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提取液 |
液体100mL |
X2 |
4℃ |
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试剂一 |
液体250μL |
x1 |
-20℃,避光 |
临用前用提取液稀释100倍，充分混匀，现配现用。用不完的试剂一可以分装冻存，避免反复冻融。 |
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试剂二 |
粉剂 |
x1 |
-20℃,避光 |
临用前，根据实验用量自行称取，称取19mg加入1mL提取液混匀溶解，现配现用。 |
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标准品 |
液体500μL |
x1 |
-20℃,避光 |
Trolox (5 mM) ，用不完的标准品可以分装冻存，避免反复冻融。 |
注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。
预实验的意义
预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测，以免造成试剂盒和样本的浪费（比如低表达处理的样本）；
2、熟悉生化试剂盒的操作流程，尤其是初次使用生化试剂盒测定；
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适；
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题，以便于及时作出调整；
5、通过3 - 5组预实验，判断试剂盒对于样本的最佳适应稀释浓度范围，指导实验样本稀释比例。
