氧消耗率荧光法检测试剂盒
测定意义
细胞的氧气主要在线粒体氧化磷酸化过程中被消耗,产生三磷酸腺苷(ATP),因此耗氧率(OCR: Oxygen Consumption Rate)是分析线粒体功能的一个重要指标。
测定原理
本试剂盒提供一种荧光探针,对氧气敏感,在封闭环境中细胞消耗氧气探针荧光随氧气量减少而增加,通过检测荧光值变化判断细胞的氧消耗率。
自备仪器和用品
荧光酶标仪、黑色96孔板(透明底)、可调式移液器、完全培养基、PBS(0.01M,pH7.4)。
试剂清单
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试剂名称 |
规格 |
数目 |
贮藏 |
备注 |
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试剂一 |
探针0.55 mL |
×1 |
4°C,避光 |
试剂一为混悬液,可摇匀后分装;试剂一使用前须混匀,使用细胞相应的完全培养基将试剂一稀释10倍, 配成工作液,配好的工作液8h内使用有效。 |
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试剂二 |
密封液8 mL |
×1 |
4°C |
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注意事项
1. 加入板孔前的所有试剂须37℃预热,检测仪器提前预热至37℃。
2. 按照操作步骤及时检测,避免错过最佳检测时间。
3. 检测过程建议维持检测环境稳定,避免晃动培养板。
4. 药物可使用完全培养基或PBS(0.01M,pH7.4)稀释后使用。
5. 试剂一和工作液容易沉降,使用前须混匀。
6. 试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围。如果样品中待测物浓度过高或过低, 请对样本做适当的稀释或浓缩。
7. 若所检样本不在说明书所列样本类型之中,建议先做预实验验证其检测有效性。
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