产品及特点
空肠弯曲杆菌空肠亚种(Campylobacter jejuni jejuni)为革兰氏阴性菌,具有多形,呈弧形、螺旋形、海鸥展翅或S形。为微需氧菌,在大气或厌氧的环境中不生长。该菌是引起人类细菌性腹泻的重要病原菌之一。胎儿弯曲杆菌又分为三个亚种,即胎儿亚种(Campylobacter jejuni fetus)、肠内亚种(Campylobacter jejuni intestinalis)和空肠亚种(Campylobacter jejuni jejuni)。目前认为,对人有致病性的是肠内亚种和空肠亚种,因此快速检测空肠弯曲杆菌空肠亚种具有重要的意义。本产品就是以探针法qPCR技术为基础开发的专门检测空肠弯曲杆菌空肠亚种的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品DNA模板。
2. 引物和探针经过优化,分析灵敏性高,可以达到100拷贝/反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据空肠弯曲杆菌空肠亚种DNA高度保守区设计,不会跟其他生物的DNA发生交叉反应。
5. 既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。
6. 本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
7. 本产品只能用于科研。
规格及成分
成分
规格
包装
2×Probe qPCR MasterMix
0.5mL
0.5mL本色盖
荧光PCR专用模板稀释液
1mL
1.5mL绿盖管
超纯水
1mL
1.5mL蓝盖管
空肠弯曲杆菌空肠亚种qPCR引物-探针干粉
50次
2.0mL棕色管
空肠弯曲杆菌空肠亚种qPCR阳性对照(1×10E7拷贝/μL)
50μL
0.5mL黄盖管
使用手册
1份
无
本产品采用五孔盒包装
注 意:引物-探针干粉在使用前需要短暂离心,然后在离心管中加入162mL的超纯水充分混匀后再使用,未用完的需要-20℃保存。
使用方法
稀释标准曲线样品以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,用带芯枪头,下同)。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样品DNA
低温运输,-20℃保存,有效期2年
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