产品及特点
超小病毒(Extra Small Virus,XSV)是动物中第一个被测序的卫星病毒,形状为二十面体,直径为15-16 nm,具有约9,00 nt的线性单链RNA基因组,其衣壳分别呈现16和17 kDa的两种多肽。超小病毒以水生昆虫作为传播载体,感染大型淡水对虾的早期生活阶段,并导致白尾病,造成孵化场和育苗场大量死亡和严重经济损失,因此快速检测超小病毒具有重要的意义。为此,本公司以探针法qRT-PCR技术为基础开发了超小病毒的检测试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,分析灵敏度高,可以达到100拷贝/反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据超小病毒RNA高度保守区设计,不会跟其他生物的RNA发生交叉反应。
5. 既可用于定性检测,又可用于定量检测。定量检测时线性范围至少为5个数量级。
6. 本产品足够50次20 μL体系的探针法qRT-PCR反应。
7. 本产品只能用于科研。
规格及成分
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成分 |
规格 |
包装 |
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探针法qRT-PCR缓冲液 |
500μL |
0.5mL蓝盖管 |
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探针法qRT-PCR酶混合液v2 |
50μL |
0.5mL红盖管 |
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荧光PCR专用模板稀释液 |
1mL |
1.5mL绿盖管 |
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超小病毒qRT-PCR引物-探针干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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超小病毒qRT-PCR阳性对照(1E7拷贝/μL) |
50μL |
0.5mL黄盖管 |
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使用手册 |
1份 |
1份 |
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本产品采用五孔盒包装 |
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注 意:引物-探针干粉在使用前需要短暂离心,然后在离心管中加入165μL的超纯水充分混匀后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀释标准曲线样品以1E1-1E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。如果需要RNA阳性样品,需要另外订购。
1. 标记6个离心管,分别为6、5、4、3、2、1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,用带芯枪头,下同)。
3. 在6号管中加入5 μL 1E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样品RNA,超纯水,核酸纯化试剂盒
低温运输,-20℃保存,有效期1年
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