柯尔替病毒(Coltivirus)属于呼肠孤病毒科,为12节段双链RNA病毒,基因组的大小约为29000 bp。柯尔替病毒的传染性和存活率比较高,可在哺乳动物体内增殖,也可在蜱、蚊子、蠓、白蛉等吸血节肢动物体内繁殖,并由其传播扩散,带毒者可能起到扩散宿主的作用。柯尔替病毒主要引起人发热和脑炎,猪、牛等家畜也可感染,柯尔替病毒对人的健康生活和部分养殖业经济造成了巨大的损害,因此快速检测柯尔替病毒具有重要的意义。为此,本公司以探针法qRT-PCR技术为基础开发了柯尔替病毒的检测试剂盒,它具有下列特点:
规格及成分
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成分 |
规格 |
包装 |
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探针法qRT-PCR缓冲液 |
500μL |
0.5mL蓝盖管 |
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探针法qRT-PCR酶混合液v2 |
50μL |
0.5mL红盖管 |
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荧光PCR专用模板稀释液 |
1mL |
1.5mL绿盖管 |
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柯尔替病毒qRT-PCR引物-探针干粉 |
50次 |
0.5mL棕色管 |
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柯尔替病毒qRT-PCR阳性对照(1E7拷贝/μL) |
50μL |
0.5mL黄盖管 |
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使用手册 |
1份 |
1份 |
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本产品采用五孔盒包装 |
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注 意:引物-探针干粉在使用前需要短暂离心,然后在离心管中加入165μL的超纯水充分混匀后再使用,未用完的需要-20℃保存。 |
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使用方法
稀释标准曲线样品以1E1-1E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。如果需要RNA阳性样品,需要另外订购。
1. 标记6个离心管,分别为6、5、4、3、2、1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,用带芯枪头,下同)。
3. 在6号管中加入5 μL 1E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样品RNA,超纯水,核酸纯化试剂盒
低温运输,-20℃保存,有效期1年
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