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  • SMMC-7721/DDP人肝癌细胞顺铂耐药株

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目录号 : TW-CC3616
    • 应用 : 仅供科研使用
    • 保存条件 : 低温保存
    • 货期 : 现货
    • 商品库存:100
      
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细胞基本信息

细胞名称

SMMC-7721/DDP人肝癌细胞顺铂耐药株

细胞品牌

通蔚生物

种属来源

组织来源

肝脏

生长特性

贴壁生长

细胞形态

上皮细胞样

细胞代数

10代以内

细胞规格

1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测

培养基

DMEM+10%FBS+PS

培养条件

气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

冻存条件

无血清冻存液,液氮储存

发货方式

复苏发货(T25瓶免运输费用)/  冻存发货(需加干冰运输费用)

供应范围

仅限于科研实验使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

特别说明

具体操作步骤以随货产品说明书为主


细胞培养操作

T25瓶

收货处理

75%酒精擦拭细胞瓶表面,放37度培养箱内静置培养2-4h,以便稳定细胞状态

传代密度

细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养

传代比例

首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

传代方法

a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化2-5 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。

注意事项

1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。

冻存管

收货处理

收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏

传代密度

第二天换液并检查细胞密度

传代比例

一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶

传代方法

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)第二天换液并检查细胞密度。


注意事项

1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存。

2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。


细胞冻存操作

冻存液配方

无血清冻存液,液氮储存

细胞密度

待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例

冻存方法

a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

注意事项

冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案


售后服务

细胞予
重发

1.细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。

2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发

3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发

4.常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发

5.常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发

6.细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发

细胞不予
重发

1.客户操作造成细胞污染,不重发

2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发

3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发

4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发

5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发

6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发

特别说明

上海通蔚生物客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打免费服务电话 : 021-54845833 ,我们随时给予实验中的免费解答。