试剂盒中取出标准品,准备7个试管,先从160ng/mL标准品(200μL)按需吸取一定量用1×稀释液稀释至8ng/mL(例:50μL的标准品母液+950μL的1×稀释液,制备得到1000μL的8ng/mL浓度标准品),随后在6个试管中分别加入500μL的1×稀释液,在这6个单独的试管中将8ng/mL标准品依次2倍倍比稀释至6个梯度,共配制7个浓度的标准品,依次为: 8ng/mL、 4ng/mL、 2ng/mL、 1ng/mL、 0.5ng/mL、 0.25ng/mL、 0.125ng/mL,从最高浓度标准品溶液中吸取500μL标准品到下一个试管中,轻轻吹打混匀,以此类推进行标准品的倍比稀释(如图所示),1×稀释液用作零浓度标准品(0ng/mL)。
示例数据
标准品浓度(ng/mL) |
8 |
4 |
2 |
1 |
0.5 |
0.25 |
0.125 |
0 |
OD值 |
2.500 |
1.601 |
0.976 |
0.65 |
0.385 |
0.204 |
0.148 |
0.062 |
校正OD值 |
2.438 |
1.539 |
0.914 |
0.588 |
0.323 |
0.142 |
0.086 |
0 |
下图所示标准曲线仅供示例,结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果