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人脊髓灰质炎病毒Sabin株探针法qRT-PCR试剂盒

规格：

品牌 : 通蔚生物
目录号 : TW-E10365
应用 : 仅限于科研使用
货期 : 1年
规格：50T

人脊髓灰质炎病毒Sabin株探针法qRT-PCR试剂盒

产品及特点
人脊髓灰质炎病毒Sabin株（Human Poliovirus Sabin Strain）是一种重要的疫苗生产毒株，用于制备脊髓灰质炎灭活疫苗，以预防由脊髓灰质炎病毒引起的急性传染病——脊髓灰质炎，又称小儿麻痹症。Sabin株是由美国病毒学家Albert B. Sabin在20世纪50年代通过减毒处理得到的脊髓灰质炎病毒毒株。这些毒株保留了病毒的免疫原性，但大大降低了其致病性，因此被广泛应用于疫苗生产。接种Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗可以诱导机体产生主动免疫，预防由脊髓灰质炎1型、2型和3型病毒导致的脊髓灰质炎。Sabin株疫苗的应用对于全球脊髓灰质炎的防控起到了极其重要的作用。在其广泛使用后，全球脊髓灰质炎的发病例数大幅下降，许多国家和地区成功消除了脊髓灰质炎的本土传播。因此快速检测人脊髓灰质炎病毒Sabin株具有重要的意义。为此，本公司以探针法qRT-PCR技术为基础开发了人脊髓灰质炎病毒Sabin株的检测试剂盒，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品RNA模板。

2. 引物和探针经过优化，分析灵敏度高，可以达到100拷贝/反应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. 特异性高，引物是根据人脊髓灰质炎病毒Sabin株RNA高度保守区设计，不会跟其他生物的RNA发生交叉反应，可以检测Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。

5. 只要用于定性检测。

6. 本产品足够50次20 μL体系的探针法qRT-PCR反应。

7. 本产品只能用于科研。

规格及成分

成分	规格	包装
探针法qRT-PCR缓冲液	500μL	0.5mL蓝盖管
探针法qRT-PCR酶混合液v2	50μL	0.5mL红盖管
荧光PCR专用模板稀释液	1mL	1.5mL绿盖管
人脊髓灰质炎病毒Sabin株qRT-PCR引物-探针溶液	50次	0.5mL棕色管
人脊髓灰质炎病毒Sabin株qRT-PCR阳性对照(1E4拷贝/μL)	50μL	0.5mL黄盖管
使用手册	1份	无
本产品采用五孔盒包装
注意：引物-探针溶液含有三种引物-探针，分别对应Sabin三个型。阳性对照也是三个Sabin株系DNA的混合液。

使用方法
样品RNA的制备

1. 如果有N个样品，设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照，用已知为阳性的样本），一个是NC（样品制备阴性对照，用已知为阳性的样本）。

2. 用自选方法纯化样品的RNA，本试剂盒跟市场上大多数RNA提取试剂盒兼容，也可以选购本公司的免提取核酸释放剂。

Probe qRT-PCR反应20 μL体系，在样品制备室进行

3. 则标记N+4个RT-PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于RT-PCR阴性对照（用水做模板），1个用于RT-PCR阳性对照。

数据处理

1. 如果样本制备阳性对照或RT-PCR阳性对照(包括标曲样本)任何一个通道结果为阴性，则整个实验无效，不需要分析数据，需要重新样本制备，重新进行RT-PCR扩增或跟厂家联系。如果样本制备阴性对照或RT-PCR阴性对照任何一个通道的结果为阳性，说明环境污染，则整个实验无效，不需要分析数据，需要跟厂家联系。

2. 如果阴性对照和阳性对照均正常，则实验有效，可以进入后续分析。

3. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，如果待测样本三个通道中所有通道的Ct必须没有读数，或者大于或等于35则判为阴性。如果三个通道中任何一个通道有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct值小于35，则判断为阳性。

自备试剂
样品RNA，超纯水，核酸纯化试剂盒

运输及保存
低温运输，-20℃保存，有效期1年

021-54845833/15800441009