烟草环斑病毒(Tobacco Ringspot Virus,TRSV)是一种影响植物的病毒,属于核糖病毒科豇豆病毒属。该病毒主要通过种子、土壤中的线虫以及农事操作等途径传播。感染烟草环斑病毒后,烟草植株会出现叶片坏死、环斑、畸形等症状,严重影响烟草的生长发育和产量品质。同时,该病毒还能侵染大豆、葡萄、黄瓜等多种经济作物,给农业生产带来较大的经济损失,因此快速检测烟草环斑病毒具有重要的意义。为此,本公司以探针法qRT-PCR技术为基础开发了烟草环斑病毒的检测试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化,分析灵敏度高,可以达到100拷贝/反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据烟草环斑病毒RNA高度保守区设计,不会跟其他生物的RNA发生交叉反应。
5. 既可用于定性检测,又可用于定量检测。定量检测时线性范围至少5个数量级。
6. 本产品足够50次20 μL体系的探针法qRT-PCR反应。
7. 本产品只能用于科研。
规格及成分
成分
规格
包装
探针法qRT-PCR缓冲液
500μL
0.5mL蓝盖管
探针法qRT-PCR酶混合液v2
50μL
0.5mL红盖管
荧光PCR专用模板稀释液
1mL
1.5mL绿盖管
烟草环斑病毒qRT-PCR引物-探针干粉
50次
0.5mL棕色管
烟草环斑病毒qRT-PCR阳性对照(1E7拷贝/μL)
50μL
0.5mL黄盖管
使用手册
1份
无
本产品采用五孔盒包装
注 意:引物-探针干粉在使用前需要短暂离心,然后在离心管中加入165μL的超纯水充分混匀后再使用,未用完的需要-20℃保存。
使用方法
稀释标准曲线样品以1E1-1E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。如果需要RNA阳性样品,需要另外订购。
1. 标记6个离心管,分别为6、5、4、3、2、1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,用带芯枪头,下同)。
3. 在6号管中加入5 μL 1E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样品RNA,超纯水,核酸纯化试剂盒
低温运输,-20℃保存,有效期1年
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