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马冠状病毒(Equine Coronavirus，ECoV)和SARS-CoV、SARS-CoV-2、MERS-CoV均是β冠状病毒属成员，其中马冠状病毒属于Embecovirus亚属，其基因组为单链正义RNA病毒，长度大约为30 knt。马冠状病毒冠状病毒粒子形状并不规则，直径约60-220nm。病毒具有包膜结构。这种病毒易于通过呼吸道传播。马冠状病毒的自然寄主主要是马科动物，尤其是马。马冠状病毒感染可导致马出现冠状病毒感染症状，包括但不限于上呼吸道疾病、肠道疾病和神经症状。在马群中，马冠状病毒可导致马出现发热、食欲不振、呼吸困难、咳嗽、鼻腔分泌物增多等症状。在严重情况下，马冠状病毒感染还可能引发腹泻和脱水，给马养殖业造成重大威胁。因此快速检测马冠状病毒具有重要的意义。为此，本公司以探针法qRT-PCR技术为基础开发了马冠状病毒的检测试剂盒，它具有下列特点：
规格及成分
成分
规格
包装
探针法qRT-PCR缓冲液
500μL
0.5mL蓝盖管
探针法qRT-PCR酶混合液v2
50μL
0.5mL红盖管
荧光PCR专用模板稀释液
1mL
1.5mL绿盖管
马冠状病毒qRT-PCR引物-探针干粉
50次
0.5mL棕色管
马冠状病毒qRT-PCR阳性对照(1E7拷贝/μL)
50μL
0.5mL黄盖管
使用手册
1份
无
本产品采用五孔盒包装
注 意：引物-探针干粉在使用前需要短暂离心，然后在离心管中加入165uL的超纯水充分混匀后再使用，未用完的需要-20℃保存。
使用方法
稀释标准曲线样品以1E1-1E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。如果需要RNA阳性样品，需要另外订购。
1. 标记6个离心管，分别为6、5、4、3、2、1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，用带芯枪头，下同）。
3. 在6号管中加入5 μL 1E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样品RNA，超纯水，核酸纯化试剂盒
低温运输，-20℃保存，有效期1年
