简介
样品收集后若在 1 周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融,标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
试剂盒中取出标准品,准备7个试管,先从20ng/mL标准品(200μL)按需吸取一定量用1×稀释液稀释至1000pg/mL(例:50μL的标准品母液+950μL的1×稀释液,制备得到1000μL的1000pg/mL浓度标准品),随后在6个试管中分别加入500μL的1×稀释液,在这6个单独的试管中将1000pg/mL标准品依次2倍倍比稀释至6个梯度,共配制7个浓度的标准品,依次为: 1000pg/mL、 500pg/mL、 250pg/mL、 125pg/mL、 62.5pg/mL、 31.25pg/mL、 15.63pg/mL,从最高浓度标准品溶液中吸取500μL标准品到下一个试管中,轻轻吹打混匀,以此类推进行标准品的倍比稀释(如图所示),1×稀释液用作零浓度标准品(0pg/mL)。

抗体工作液配置
使用前10分钟,将100×生物素化抗体于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×生物素化抗体工作液,根据所需用量当日配置当日使用。
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
标准品浓度(pg/mL) |
1000 |
500 |
250 |
125 |
62.5 |
31.25 |
15.63 |
0 |
OD值 |
2.587 |
1.728 |
1.048 |
0.656 |
0.442 |
0.278 |
0.194 |
0.055 |
校正OD值 |
2.532 |
1.673 |
0.993 |
0.601 |
0.387 |
0.223 |
0.139 |
0 |
下图所示标准曲线仅供示例,结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果
重复性
经样本测试,本试剂盒的检测灵敏度为7.82pg/mL。
其他相关蛋白在稀释缓冲液中制备为50ng/mL,并测定交叉反应性。没有观察到明显的交叉反应。
使用ELISA试剂盒之前,请您必须完整阅读说明书,本产品仅供科研使用,不能于临床诊断或治疗。