样品收集后若在 1 周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融,标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
试剂盒中取出标准品,准备7个试管,先从500μg/mL标准品(200μL)按需吸取一定量用1×稀释液稀释至25000ng/mL(例:50μL的标准品母液+950μL的1×稀释液,制备得到1000μL的25000ng/mL浓度标准品),随后在6个试管中分别加入500μL的1×稀释液,在这6个单独的试管中将25000ng/mL标准品依次2倍倍比稀释至6个梯度,共配制7个浓度的标准品,依次为: 25000ng/mL、 12500ng/mL、 6250ng/mL、 3125ng/mL、 1562.5ng/mL、 781.25ng/mL、 390.63ng/mL,从最高浓度标准品溶液中吸取500μL标准品到下一个试管中,轻轻吹打混匀,以此类推进行标准品的倍比稀释(如图所示),1×稀释液用作零浓度标准品(0ng/mL)。

以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
标准品浓度(ng/mL) |
25000 |
12500 |
6250 |
3125 |
1562.5 |
781.25 |
390.63 |
0 |
OD值 |
2.456 |
1.718 |
1.067 |
0.755 |
0.494 |
0.255 |
0.198 |
0.057 |
校正OD值 |
2.399 |
1.661 |
1.01 |
0.698 |
0.437 |
0.198 |
0.141 |
0 |
下图所示标准曲线仅供示例,结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果

重复性