样品收集后若在 1 周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融,标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
如果洗涤液/稀释液(20×)有晶体析出,需在37℃下加热⾄晶体全部溶解。用蒸馏水1:20稀释(例如:1mL 浓缩洗涤液加入19mL的蒸馏水)
试剂盒中取出标准品,准备7个试管,先从200ng/mL标准品(200μL)按需吸取一定量用1×稀释液稀释至10000pg/mL(例:50μL的标准品母液+950μL的1×稀释液,制备得到1000μL的10000pg/mL浓度标准品),随后在6个试管中分别加入500μL的1×稀释液,在这6个单独的试管中将10000pg/mL标准品依次2倍倍比稀释至6个梯度,共配制7个浓度的标准品,依次为: 10000pg/mL、 5000pg/mL、 2500pg/mL、 1250pg/mL、 625pg/mL、 312.5pg/mL、 156.25pg/mL,从最高浓度标准品溶液中吸取500μL标准品到下一个试管中,轻轻吹打混匀,以此类推进行标准品的倍比稀释(如图所示),1×稀释液用作零浓度标准品(0pg/mL)。

使用前10分钟,将100×生物素化抗体于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×生物素化抗体工作液,根据所需用量当日配置当日使用。
使用前10分钟,将100×SA-HRP溶液于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×SA-HRP稀释成1×SA-HRP工作液,根据所需用量配置。
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
标准品浓度(pg/mL) |
10000 |
5000 |
2500 |
1250 |
625 |
312.5 |
156.25 |
0 |
OD值 |
2.491 |
1.667 |
1.087 |
0.695 |
0.352 |
0.286 |
0.199 |
0.057 |
校正OD值 |
2.434 |
1.61 |
1.03 |
0.638 |
0.295 |
0.229 |
0.142 |
0 |
下图所示标准曲线仅供示例,结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果

重复性