样品收集后若在 1 周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融,标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
如果洗涤液/稀释液(20×)有晶体析出,需在37℃下加热⾄晶体全部溶解。用蒸馏水1:20稀释(例如:1mL 浓缩洗涤液加入19mL的蒸馏水)
试剂盒中取出标准品,准备7个试管,先从400ng/mL标准品(200μL)按需吸取一定量用1×稀释液稀释至20ng/mL(例:50μL的标准品母液+950μL的1×稀释液,制备得到1000μL的20ng/mL浓度标准品),随后在6个试管中分别加入500μL的1×稀释液,在这6个单独的试管中将20ng/mL标准品依次2倍倍比稀释至6个梯度,共配制7个浓度的标准品,依次为: 20ng/mL、 10ng/mL、 5ng/mL、 2.5ng/mL、 1.25ng/mL、 0.625ng/mL、 0.313ng/mL,从最高浓度标准品溶液中吸取500μL标准品到下一个试管中,轻轻吹打混匀,以此类推进行标准品的倍比稀释(如图所示),1×稀释液用作零浓度标准品(0ng/mL)。

使用前10分钟,将100×生物素化抗体于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×生物素化抗体工作液,根据所需用量当日配置当日使用。
使用前10分钟,将100×SA-HRP溶液于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×SA-HRP稀释成1×SA-HRP工作液,根据所需用量配置。
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
					
					 
										标准品浓度(ng/mL)
									 
										20
									 
										10
									 
										5
									 
										2.5
									 
										1.25
									 
										0.625
									 
										0.313
									 
										0
									 
										OD值
									 
										2.543
									 
										1.673
									 
										0.938
									 
										0.739
									 
										0.43
									 
										0.282
									 
										0.168
									 
										0.057
									 
										2.486
									 
										1.616
									 
										0.881
									 
										0.682
									 
										0.373
									 
										0.225
									 
										0.111
									 
										0
									
						
							
								 
							
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
							
								 
							
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
							
								 
						
					
									
								 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
								
									 
							
				

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