产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增蓝氏贾第鞭毛虫A型,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 | 
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(红盖) | 
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) | 
| 试剂三 | 蓝氏贾第鞭毛虫A型 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) | 
| 试剂四 | 蓝氏贾第鞭毛虫A型 PCR 阳性对照(1×10E8 /μL) | 50 μL(黄盖) | 
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 | 
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样品 RNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备:
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 蓝氏贾第鞭毛虫A型 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系):
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 | 
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL | 
| 蓝氏贾第鞭毛虫A型PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL | 
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- | 
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- | 
| PCR 阳性对照(蓝氏贾第鞭毛虫A型PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL | 
| 过程 | 温度 | 时间 | 
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 
| PCR 反应35个循环 | 95℃ | 30 sec | 
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min | 
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
四、特别提示:
本公司的所有产品,仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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