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  • 小鼠阴道壁成纤维细胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目录号 : TW33870
    • 应用 : 仅供科研使用
    • 保存条件 : 低温保存
    • 货期 : 现货
    • 商品库存:100
      
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产品简介
产品名称 :小鼠阴道壁成纤维细胞
产品品牌 :通蔚生物
组织来源 :阴道组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶

细胞简介
小鼠阴道壁成纤维细胞分离自阴道组织。阴道位于膀胱、尿道和直肠之间,是一个富有弹性的管状器官。它在人类生殖过程中具有多种生理功能,是连接子宫与外阴的通道,是排出月经血、娩出婴儿的必经之路,也是一个重要的性交器官。阴道壁按组织学由外到内分三层,即黏膜层、肌层和外膜。1) 黏膜层由上皮和固有膜组成。上皮较厚,为复层鳞状上皮,从基底层到表层由基底层、旁基底层、中间层和表层组成。

没有角化层。阴道粘膜的基底层呈细波纹状起伏。2) 肌层由平滑肌组织构成,肌束排列不规则,纵行和环形互相交错。肌束间有较多的结缔组织和弹性纤维。阴道外口有环形的横纹肌称括约肌。3) 外膜层为纤维膜,由结缔组织构成,内含丰富的弹性纤维、静脉丛、淋巴管和神经。大鼠阴道壁成纤维细胞主要分离自外膜层,成纤维细胞(Fibroblast) 是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。

成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。

方法简介
通蔚生物实验室分离的小鼠阴道壁成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测
通蔚生物实验室分离的小鼠阴道壁成纤维细胞经Vim entin免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息
培 养  基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :成纤维细胞样
传代特性 :可传2-3代左右。2代以内状态最佳
传代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相:空气,95% 。C O2,5%
小鼠阴道壁成纤维细胞体外培养周期有限。建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片

使用方法
小鼠阴道壁成纤维细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在通蔚生物技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代左右。2代以内状态最佳。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。