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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目录号 : TW33217
    • 应用 : 仅供科研使用
    • 保存条件 : 低温保存
    • 货期 : 现货
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猪雪旺氏细胞
产品简介
产品名称 :猪雪旺氏细胞
产品品牌 :通蔚生物
组织来源 :神经组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶

细胞简介
猪雪旺氏细胞分离神经组织。周围神经系统中的神经胶质细胞称施万(schwann,又名雪旺细胞)细胞,它沿神经元的突起分布。施万细胞包裹在神经纤维上,这种神经纤维叫有髓神经纤维。有髓神经纤维和无髓神经纤维的施万细胞的形态和功能有所差异,施万细胞的外表面有基膜,能分泌神经营养因子,促进受损的神经元的存活及其轴突的再生,参与周围神经系统中神经纤维的构成。

施万细胞的胞核呈长卵圆形,其长轴与轴突平行,核周有少量胞质。由于施万细胞包在轴突的外面,故又称神经膜细胞(neurilemmalcell),它的外面包有一层基膜。施万细胞最外面的一层胞膜与基膜一起往往又称神经膜(neurilem m a),光镜下可见此膜。在有髓神经纤维发生中,伴随轴突一起生长的施万细胞表面凹陷成一纵沟,轴突位于纵沟内,沟缘的胞膜相贴形成轴突系膜(m esaxon)。

轴突系膜不断伸长并反复包卷轴突,把胞质挤至细胞的内、外边缘及两端(即靠近郎氏结处),从而形成许多同心圆的螺旋膜板层,即为髓鞘。故髓鞘乃成自施万细胞的胞膜,属施万细胞的一部分。施万细胞的胞质除见于细胞的外、内边缘和两端外,还见于髓鞘板层内的施-兰
切迹。该切迹构成螺旋形的胞质通道,并与细胞外、内边缘的胞质相通。

方法简介
通蔚生物实验室分离的猪雪旺氏细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测
通蔚生物实验室分离的猪雪旺氏细胞经S-100免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息
培 养  基 :含FBS、bFG F、Insulin、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :双极、多极形
传代特性 :可传1-2代
传代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相:空气,95% 。C O2,5%
猪雪旺氏细胞体外培养周期有限。建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片

使用方法
猪雪旺氏细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈双极、多极形,在通蔚生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-2代。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2)添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至
5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4)待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 复苏操作说明
1. 准备好37度水浴锅,预热至37度。
2. 准备好T25培养瓶,加入10ml完全培养基(培养基量必须大于冻存液10倍体积)。
3. 取出干冰内冻存细胞管,用EP手套包裹冻存管(防止管内进水导致污染),迅速放于水
浴锅内,于1min内融化完全。
4. 取出冻存管,酒精喷洒消毒后擦干,置于超净台内。
5. 吸取冻存管内细胞悬液,加入步骤2中准备好的T25培养瓶内,8字缓慢摇匀。
6. 培养瓶放于37度C O 2恒温培养箱内,静置培养24h,更换新鲜换培养基(注意贴壁细胞、悬浮细胞不同换液操作方法)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。