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通蔚生物就ELISA试剂结果白板与花板详细介绍

发布时间:2023-03-28     发布作者:上海通蔚生物

如果显色完成后,肉眼可见整板没有显示反应,可能原因及应对方法是什么呢?通蔚生物整理了可能的原因,希望对您有帮助。
解决方案:
1,试剂盒储存不当;不同ELISA试剂盒试剂混用购买新的试剂盒,注意储存条件;不可混用
2,孵育温度低,时间短如果温度偏低,则延长孵育时间和显色时间。
3,错加、漏加试剂严格按照说明书步骤添加正确试剂。
4,用于配置溶液的容器不干净,或水有问题使用干净容器以及合格的蒸馏水。
5,检测抗体和/或HRP浓度太低参照说明书,不可随意稀释。
6,试剂温度不均一所有试剂要室温平衡30min。
7,洗板过程中浸泡时间长,洗板次数太多,洗板冲击力大,严格按说明书操作。
二、花板
花板是指空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的吸光度(OD值)却明显偏高,可能原因及应对方法详见下表。
1,洗涤次数少,不充分按说明书要求洗涤。
2,底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)被金属离子或氧化剂污染或曝光配置时使用干净容器以及合格蒸馏水;避光保存。
3,孵育温度高和/或时间过长控制孵育和最后酶促反应的温度和时间。
4,ELISA试剂盒加样时未更换枪头,造成交叉污染每个样都更换枪头。
5,附近孔交叉污染洗涤时,洗液不可溢出孔洞,垂直拍板;使用合适的拍板纸,避免孔内进入纸屑尘渣;孵育时封板要严密,防止阳性标本的液体蒸发。
6,样本存在内源性干扰物质推测可能的感染物质,并进行对应处理。
7,样本溶血、贮存过久、凝集不全、被细菌污染、采血管中添加物影响等避免溶血、污染、过久储存等现象。