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ELISA技术支持

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elisa有几种类型?原理是什么?

发布时间:2022-01-15     发布作者:上海通蔚生物

ELISA法类型:

夹心法常用于检测大分子抗原,将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体,重复两次,洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果。

间接法常用于检测抗体,将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原,重复两次。洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器测定塑胶盘中的吸光值,以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。

竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制,一般用于检测小分子抗原,将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体;加入待测检体、带有酶的抗原,与塑胶孔盘上的抗体专一性键结。塑胶孔盘上固著抗体数量有限,检体中抗原量越多,带有酶的抗原可键结固著抗体就越少。

elisa实验原理:

在测定时把受检标本和酶标抗原或抗体,按不同步骤与固相载体表面抗原或抗体起反应。用洗涤方法使固相载体上的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。

加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅有无定性或定量分析。