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  • 人肾脏微血管内皮细胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目录号 : TW33571
    • 应用 : 仅供科研使用
    • 保存条件 : 低温保存
    • 货期 : 现货
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产品简介
产品名称 : 人肾脏微血管内皮细胞
产品品牌 : 通蔚生物
组织来源 : 肾组织
产品规格 : 5×105cells/T 25细胞培养瓶

细胞简介
人肾脏微血管内皮细胞分离自肾脏;肾脏是人体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水分及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾脏内部的结构,可分为肾实质和肾盂两部分。

在肾纵切面可以看到,肾实质分内外两层:外层为皮质,内层为髓质。肾皮质位于肾实质表层,富含血管,新鲜时呈红褐色,由一百多万个肾单位组成。每个肾单位由肾小体和肾小管所构成,部分皮质伸展至髓质锥体间,成为肾柱。肾髓质位于肾皮质的深面,血管较少,色淡红,为10-20个锥体所构成。肾锥体在切面上呈三角形。锥体底部向肾凸面,尖端向肾门,锥体主要组织为集合管,锥体尖端称肾乳头,每一个乳头有10-20个乳头管,向肾小盏漏斗部开口。在肾窦内有肾小盏,为漏斗形的膜状小管,围绕肾乳头。肾锥体与肾小盏相连接。每肾有7~8个肾小盏,相邻2~3个肾小盏合成一个肾大盏。每肾有2~3个肾大盏,肾大盏汇合成扁漏斗状的肾盂。肾盂出肾门后逐渐缩窄变细,移行为输尿管。

肾单位是肾脏结构和功能的基本单位。肾小体包括肾小球和肾小囊。肾小体内有一个毛细血管团,称为肾小球,肾小球是个血管球。它由肾动脉分支形成。肾小球外有肾小囊包绕。肾小囊分两层,两层之间有囊腔与肾小管的管腔相通。肾小管汇成集合管。若干集合管汇合成乳头管,尿液由此流入肾小盏。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的最微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7~9微米,数量极多,成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成,厚约0.5微米。

基膜外面有薄层结缔组织,其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。最细的毛细血管由一个内皮细胞围成管腔,较粗的毛细血管由2~3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的毛细血管,内皮细胞间为缝隙连接(缝隙宽150埃),称连续毛细血管;分布于内分泌腺、肾脏等处的毛细血管,除有缝隙连接外,细胞本身有许多小孔,(孔径800~1000埃),称有孔毛细血管;分布于肝、脾、骨髓及某些内分泌腺的毛细血管,管腔扩大,称血窦。毛细血管的管壁薄、通透性大、管径细(8~10微米)、数量多、血流速度慢,这些特点使其成为血液与组织液进行物质交换的场所,又称交换血管。血窦(sinusoid)由毛细血管管腔扩大而成,窦壁的一般结构与毛细血管壁相同,由单层内皮细胞构成,某些内分泌腺的血窦有连续的基膜。

方法简介
通蔚生物实验室分离的人肾脏微血管内皮细胞采用胶原酶消化,结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测
通蔚生物实验室分离的人肾脏微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息
培 养  基 : 含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 : 每2-3天换液一次
生长特性 : 贴壁 
细胞形态 : 内皮细胞样
传代特性 : 可传2-3代
传代比例 : 1:2
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白酶
培养条件 : 气相:空气,95% ;C O2,5%
人肾脏微血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片

使用方法
人肾脏微血管内皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈内皮细胞样,在通蔚生物技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1.取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2.贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3.复苏操作说明
1.准备好37度水浴锅,预热至37度。
2.准备好T25培养瓶,加入10ml完全培养基(培养基量必须大于冻存液10倍体积)。
3.取出干冰内冻存细胞管,用EP手套包裹冻存管(防止管内进水导致污染),迅速放于水
浴锅内,于1min内融化完全。
4.取出冻存管,酒精喷洒消毒后擦干,置于超净台内。
5.吸取冻存管内细胞悬液,加入步骤2中准备好的T25培养瓶内,8字缓慢摇匀。
6.培养瓶放于37度C O 2恒温培养箱内,静置培养24h,更换新鲜换培养基(注意贴壁细胞、悬浮细胞不同换液操作方法)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1m g/m l),明胶(0.1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。